ORF1ab e la prova rapida SARS-COV-2 RT-QPCR di PCR dei geni di N analizzano la fluorescenza tripla

Analisi di SARS-COV-2 RT-qPCR (metodo triplo di fluorescenza RT-PCR), rilevazione dei geni di N e di ORF1ab del SAR CoV 2

L'analisi del qPCR di SARS-COV-2 RT è una prova in tempo reale di reazione a catena della polimerasi della trascrittasi inversa (rt) (RT) (PCR) destinata alla rilevazione qualitativa dei geni di N e di ORF1ab del SAR CoV 2 in tampone rinofaringeo (NP), in tampone (OP) orofaringeo e nell'esemplare dell'espettorato raccolti da un lavoratore di sanità, dai pazienti sospettati di COVID-19 dal loro fornitore di cure mediche.

Caratteristiche

• Alta precisione
• Limite di rilevazione: 200 copie/ml
• Sensibilità: 100%
• Specificità: 99,1%
• Accuratezza: 99,3%

Operazione conveniente

le Triplex-rilevazioni in un singoli iniettore e sonda del tubo (geni di N & di ORF1ab, gene umano della RNAsi P (RNP)) hanno premescolato la forma liquida

Affidabile

• Sistema antiinquinamento: UDG
• Controllo interno: Gene umano di RNaseP (RNP)
• Controllo positivo: Pseudovirus

Veloce

Risultato in circa 1 ora

STRUMENTI APPLICABILI:

Strumento in tempo reale di PCR con i canali di FAM, del TEXAS RED/ROX e di HEX/VIC, quale ABI7500, ABI Q3, ABI Q6, bio- rad CFX96.

Polmonite novella del coronavirus (coronavirusdisease2019, covid-19). l'infezione sars-cov-2 è un problema sanitario di salute pubblica globale serio che ha causato le perdite economiche severe universalmente, conducente l'organizzazione mondiale della sanità (WHO) per caratterizzare lo scoppio sars-cov-2 come emergenza di salute pubblica di preoccupazione internazionale.

La selezione in anticipo dei casi e dell'isolamento sospettati ed il trattamento dei pazienti infettati con sars-cov-2 sono chiave a controllare lo scoppio, poichè non c'è droga o vaccino specifica disponibile trattare la polmonite del neocrown. Attualmente, la parità aurea per la diagnosi dell'infezione sars-cov-2 è la reazione a catena della reversetranscription-polimerasi (rt-PCR). Dal rilascio del genoma completo di sars-cov-2, i laboratori di salute pubblica, i laboratori clinici e le società diagnostiche dai paesi differenti hanno messo a punto vari metodi rt-PCR per rilevazione sars-cov-2, mirando ai geni differenti ed alle regioni genomiche del genoma virale (orf1ab, rdrp, n, e, ecc.).

Tuttavia, il metodo rt-PCR ha rivelato molti svantaggi ed imperfezioni in pratica, particolarmente durante le emergenze di salute pubblica quale lo scoppio corrente sars-cov-2. i metodi rt-PCR sono ingombranti eseguire ed avere bisogno di di essere eseguito sugli strumenti di PCR dai tecnici di laboratorio professionisti formati.

Ciò lo rende difficile rispondere all'esigenza di prova in loco e per le regioni isolate o gli ospedali primari con le risorse limitate, i campioni devono essere trasportati ad un ospedale di più alto livello con gli impianti prove rt-PCR per provare. Ciò è non solo che richiede tempo ma inoltre aumenta il rischio di esposizione del virus. Inoltre, la rt-PCR per prova sars-cov-2 durante la pandemia covid-19 ha prodotto un alto tasso del falso negativo (30-50%) per una serie di ragioni, che rimane un problema non trascurabile.

La reazione catalitica dell'auto-assemblea del DNA della forcella (catalytichairpinassembly, cha) è un sistema acido nucleico senza enzima isotermico di amplificazione del segnale. Due insiemi delle sonde di DNA unico incagliate complementari con una struttura della forcella sono progettati basati sul frammento del RNA dell'obiettivo che è individuato. Quando il frammento dell'obiettivo non è assente, entrambi gli insiemi di DNA unico incagliato sono presenti in una struttura della forcella.

Quando il frammento del RNA dell'obiettivo è presente nel sistema, i due insiemi delle sonde di DNA unico incagliate con la struttura della forcella apriranno la struttura della forcella a loro volta e formeranno un doppio filo del DNA nell'ambito dell'effetto catalitico del RNA dell'obiettivo. L'intero processo catalitico non consuma il frammento del RNA dell'obiettivo ed il frammento del RNA dell'obiettivo invita i due insiemi delle sonde di DNA unico incagliate per formare un doppio filo prima della continuazione al prossimo giro della reazione, così creando l'amplificazione del segnale. Per concludere, la rilevazione del frammento del RNA dell'obiettivo è raggiunta individuando la sonda di DNA a doppia elica.